サンプルの準備:
サンプル収集:実験の目的に従って、血液、組織、唾液、尿などのサンプルを収集します。
DNA抽出:専用のDNA抽出キットを使用して、サンプルからDNAを抽出します。
PCR反応準備:
設計プライマー:テンプレートDNAを増幅するためのターゲットシーケンスに基づいて、特定のプライマーペアを設計します。
反応混合物の準備:テンプレートDNA、プライマー、バッファー、DNAポリメラーゼ、DNTP(デオキシヌクレオシド三リン酸)、Mg 2+などを含む。
PCRプログラムの設定:
PCR機器の設定:95度予熱温度、変性温度(95度など)、アニーリング温度(55度など)、延長温度(72度など)、サイクル数など、プリセットPCRサイクルパラメーターを入力します。
PCR反応:
サンプルの追加:反応混合物をPCR反応タンクまたはチップに追加すると、各サンプルには通常1つの反応があります。
PCRを実行する:PRCR機器は、加熱、冷却、アニーリング、延長ステップなど、プリセットプログラムに従ってサイクルを繰り返します。
製品分析:
増幅後の冷却:PCRが完了した後、サンプルは4度で一時的に冷却されます。
電気泳動分離:アガロースゲル電気泳動などのゲル電気泳動技術を使用して、異なる長さのPCR産物を分離します。
蛍光スキャン:蛍光標識プライマーは、増幅された生成物の特定の波長の光を放出し、PCR機器はこれらの信号を読み取り、記録します。
データ処理と解釈:
データ分析ソフトウェア:特殊なソフトウェアを使用して、蛍光信号を分析し、ターゲットフラグメントの濃度または相対濃度を計算します。
結果の解釈:PCR曲線とベースラインに基づいて、PCRが成功しているかどうか、ターゲットフラグメントが存在するかどうか、それがどれだけあるかを決定します。
結果の記録と保存:
結果を実験レポートに記録し、元のデータとサンプルを適切に保存します。




